Los métodos de análisis que van a emplearse en los laboratorios clínicos han de evaluarse para conocer sus características de funcionamiento. La evaluación de los métodos analíticos debe comprender tanto los requerimientos prácticos como las características analíticas. Asimismo, los laboratorios clínicos deben fijar objetivos de calidad analítica.
Estos objetivos pueden fijarse en función de diversos criterios.
En este capítulo se exponen las principales técnicas para la evaluación de los métodos analíticos y la determinación de los objetivos de calidad analítica.
REQUERIMIENTOS PRÁCTICOS DE UN MÉTODO ANALÍTICO
Los requerimientos prácticos de un método analítico
comprenden sus características de realización que determinan si puede funcionar
adecuadamente en el laboratorio clínico. Los factores principales que determinan
que un método pueda realizarse en él son el tamaño del espécimen, la rapidez,
la dificultad técnica, el grado de dependencia, la frecuencia de calibración,
el coste por prueba y la peligrosidad de los reactivos y su seguridad.
Tamaño de espécimen
La cantidad de espécimen que necesita un método es un factor
clave en los métodos analíticos que se emplean en los laboratorios, ya que en
ocasiones no se dispone de una gran cantidad de espécimen.
Rapidez
La evaluación de la rapidez de un método debe analizar dos
variables descriptivas relacionadas con el tiempo: la velocidad a la que pueden
procesarse los especímenes, y el intervalo que transcurre entre la recepción
del espécimen y la disponibilidad del resultado. En el primero se analiza el
tiempo que tarda en procesarse el espécimen con ese método y, en el segundo,
cada cuánto tiempo se realiza.
Dificultad técnica
Es también importante estudiar la dificultad de los
diferentes pasos del método. Algunos métodos son muy fáciles, porque requieren
pocos pasos de procesado, mientras que otros son complejos, porque tienen
muchos pasos.
Grado de dependencia
Asimismo, debe valorarse el grado de dependencia de los
instrumentos utilizados para realizar el método.
Frecuencia de
calibración
Es fundamental conocer la frecuencia de calibración para
proporcionar unos resultados fiables. Debe conocerse la estabilidad de la
calibración y cada cuánto tiempo hay que realizarla.
Coste por prueba
El coste de un método incluye no sólo el gasto en los
reactivos y los materiales necesarios para preparar los especímenes y hacer el
análisis, sino también los costes de amortización y de operación, los de
trabajo —que dependen de los conocimientos técnicos que debe tener la persona
que lo realice— y los costes correspondientes de los gastos generales del
laboratorio.
Peligrosidad de los
reactivos y seguridad
Finalmente, hay que analizar la seguridad del método, en
términos de riesgos químicos, como explosiones y reactivos venenosos o
cancerígenos, y de posibles riesgos microbiológicos. También deben ponderarse
los riesgos derivados de accidentes, como las salpicaduras de los reactivos.
CARACTERÍSTICAS
ANALÍTICAS
Toda medida cuantitativa es afectada por factores que la
apartan del valor verdadero. Las causas principales de variabilidad analítica
se deben a errores sistemáticos y errores aleatorios.
Los errores sistemáticos pueden dividirse en cuatro
categorías: errores de muestreo, errores del método, errores de la medida y
errores personales. Los errores de muestreo son los que se introducen durante
la obtención del espécimen. Los del método se deben a las limitaciones del
método de análisis. Los de la medida son fruto de las limitaciones del equipo y
de los instrumentos utilizados para realizarla. Finalmente, los errores
personales son obra del analista que efectúa la medida. Los errores
sistemáticos cambian la posición de la media, con un sesgo que puede ser
positivo o negativo. Sin embargo, afectan poco a la variabilidad de los
resultados.
Los errores aleatorios se deben a lecturas incorrectas de
los instrumentos, cálculos equivocados, el cambio de especímenes y el uso de
reactivos o de estándares preparados de forma incorrecta. Estos errores
aumentan la variabilidad de los resultados, y afectan poco a la media. Los
principales parámetros de eficacia analítica de un método son: precisión, exactitud,
sensibilidad analítica, especificidad analítica, interferencias e intervalo de
linealidad. En los apartados siguientes se detallan cada uno de estos
parámetros.
PRECISIÓN ANALÍTICA
La precisión analítica de un método da cuenta de la
concordancia entre las medidas repetidas con un mismo espécimen. La precisión
es un término conceptual que no posee valor numérico. El término cuantitativo
es la imprecisión, que se define como la desviación estándar o el coeficiente
de variación de los resultados de un conjunto de medidas repetidas. La
imprecisión informa del error aleatorio.
Las principales causas que contribuyen a la imprecisión de
los resultados de un método son emplear diferentes reactivos, personal,
estándares de calibración y series analíticas. Durante la evaluación de un
método deben mantenerse constantes tantos factores como se pueda, por ejemplo,
usar el mismo lote de reactivos, los mismos estándares y el mismo personal de
laboratorio, aunque debe estudiarse también el efecto de la variación de estos
factores. En los estudios de precisión hay que obtener la imprecisión
intraserial y la interserial:
- La imprecisión intraserial se obtiene analizando especímenes, generalmente de tres concentraciones diferentes (baja, normal y alta) del intervalo analítico, de forma repetida (de 10 a 20 veces) en la misma serie de análisis. A partir de los datos, se obtienen los coeficientes de variación para cada concentración. La imprecisión intraserial proporciona un valor optimista, ya que se producen menos oportunidades de variación dentro de una serie que entre series.
- La imprecisión interserial se obtiene con los mismos especímenes. Se preparan 20 alícuotas de cada uno de los especímenes que se congelan, descongelando cada día uno para su análisis, durante 20 días consecutivos de trabajo. A partir de los resultados, se calcula el coeficiente de variación para cada concentración. La imprecisión interserial es el valor más real de la precisión de un método y el que observa el médico solicitante cuando usa esa determinación, ya que incluye todas las causas que contribuyen a la imprecisión.
Para analizar el efecto de la concentración sobre la
imprecisión se representan los coeficientes de variación frente a la
concentración de la sustancia. Si la imprecisión es constante en el intervalo
analítico, los coeficientes de variación proporcionarán una línea recta,
mientras que si la imprecisión es proporcional a la concentración de la
sustancia, el coeficiente aumentará al crecer la concentración.
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